北美负鼠，学名Didelphis virginiana，有袋下纲、负鼠目、负鼠科、负鼠属哺乳动物。栖息在北美洲格兰德河以北唯一的有袋类动物。它是独行及夜间活动的动物，约有家猫的大小。它们的祖先在南美洲开始演化，并在300万年前藉南北美洲生物大迁徙而进入北美洲。它们一般在近城市出没，或是在垃圾堆中翻寻，或躺在路边，甚至成为车下亡魂。

北美负鼠是负鼠属中最大的成员，且是负鼠目最大的。它们一般长38-51厘米，重4-6公斤。它们的毛皮呈深灰褐色，面部的毛呈白色。北美负鼠的尾巴很长，没有毛，能抓着树枝及细小的物件。它们的耳朵没有毛，鼻长而扁。北美负鼠有50颗牙齿，后肢的拇趾没有爪及可与其余四趾相反。北美负鼠有13个乳头，其中12个围成一个圆形及1个在中间。

北美负鼠的脚印可见有5趾。后肢脚印由于拇趾的关系而很特别，一般拇趾印都与其余四趾成90°或甚至180°。成年北美负鼠的前肢脚印可以达到 4.8×5.1厘米，而后肢则达6.4×5.7厘米。北美负鼠除了后肢拇趾外，所有的脚趾都有爪，有时可以在脚印上看到爪的痕迹。在软的地上，如泥泞中，甚至可以见到脚垫。

北美负鼠在一侧的前后肢会同时行进，紧接着是另一侧的前后肢。故此它行走时左前肢与右后肢(或相反)会同时著地。但是，如果北美负鼠不是行走，而是奔跑的话，则会是另一种模式。其他有相似步调的动物有浣熊、熊、臭鼬、獾、土拨鼠、豪猪及河狸。北美负鼠每步约有18-25厘米。